Chapitre 5. Chromatographie planaire

La séparation par chromatographie planaire des constituants de l’échantillon est réalisée sur une fine couche (100-200 μm) de phase stationnaire, généralement à base de gel de silice, déposée sur une plaque rectangulaire de verre, de plastique ou d’aluminium, de quelques centimètres de côté. Pour maintenir la phase stationnaire sur ce support et assurer la cohésion des particules, un liant organique est incorporé au cours de la fabrication de la plaque.
Le principe du partage des solutés entre les deux phases en présence (stationnaire et mobile), est semblable à celui de la CLHP, mais la conduite d’une analyse par CCM est différente. On distingue trois étapes : le dépôt de l’échantillon, le développement de la plaque et la révélation post-chromatographique.On commence par déposer par capillarité ou par vaporisation un petit volume (compris entre quelques nanolitres et plusieurs microlitres) de l’échantillon en solution dans un solvant convenable, à proximité du bord inférieur de la plaque.
Le dépôt par capillarité, sous forme d’une tache de 1 à 3 mm de diamètre, est réalisé soit manuellement, soit de manière automatique, avec un capillaire à extrémité plane (fig. 5.1). Cette méthode s’accompagne d’une diffusion de l’échantillon au niveau de la tache, ce qui interdit toute séparation complexe.
Le dépôt par vaporisation sous l’effet d’un courant d’azote, permet, quant à lui, de débarrasser l’échantillon du solvant de dilution, et de le déposer sous forme d’une petite bande horizontale de concentration homogène sur toute sa longueur…