Chapitrer 8. Électrophorèse capillaire haute performance

L’électrophorèse capillaire repose sur la migration, dans un champ électrique et au contact d’un support approprié, des espèces présentes dans l’échantillon en solution, porteuses ou non d’une charge électrique globale. Elle correspond à une adaptation technologique de la méthode générale d’électrophorèse.Dans cette technique, encore largement utilisée en bioanalytique, on utilise une bandelette de polymère recouverte d’une substance poreuse imprégnée d’un électrolyte (à l’origine on utilisait des bandelettes de papier). Ses extrémités plongent dans deux réservoirs indépendants contenant cet électrolyte. Dans chaque réservoir, plonge une électrode reliée pour l’une au pôle positif et pour l’autre au pôle négatif d’un générateur de courant continu (fig. 8.1).
L’échantillon est déposé sous forme d’un trait transversal sur la bandelette, éventuellement refroidie (pour éviter l’échauffement par effet Joule) et emprisonnée entre deux plaques isolantes (protection). Les espèces ioniques hydratées présentes dans ce dépôt migrent à des vitesses variables, donc en des temps variables (de quelques secondes à quelques heures) vers l’une ou l’autre des extrémités de la bandelette (selon leur charge : signe, multiple ou unique, son volume donc sa mobilité). L’absence d’un front de solvant impose l’utilisation d’un marqueur interne pour repérer la distance de migration.
La détection des espèces, après migration, s’effectue généralement en les transférant sur une membrane par contact…