Fiche 61. Les propriétés physico-chimiques de l’ADN

Les acides nucléiques (ADN et ARN) possèdent des propriétés physicochimiques communes :
à pH physiologique, ce sont des polymères chargés négativement, charges dues aux groupements phosphates car à ce pH, les bases ne portent aucune charge. Cette propriété est utilisée pour les séparer par électrophorèse.
ce sont des molécules solubles dans l’eau sous forme de sels d’acides nucléiques.
ils sont insolubles dans l’alcool ce qui permet leur précipitation par l’éthanol ou l’isopropanol.
les deux molécules sont sensibles à l’hydrolyse acide qui conduit à la dégradation totale de ces molécules dans des conditions drastiques (HCl 6N à 120 °C) ou à la coupure des liaisons N-osidiques avec les purines (dépurination) dans des conditions douces (HCl 1N à 60 °C).
Mais l’ADN de par sa structure en double hélice et la présence de désoxyribose présente des propriétés qui lui sont propres.
Le spectre d’absorption d’une solution d’ADN met en évidence une large bande d’absorption dans l’UV proche avec un maximum à 260 nm (figure 1). Ce sont les bases azotées qui sont responsables de cette absorption. Cette propriété optique est communément utilisée pour le dosage et le contrôle de la pureté des acides nucléiques.
Pour une détermination approximative de la concentration d’une solution pure d’ADN, on peut assumer qu’une solution aqueuse contenant 50 μg/mL d’ADN donne une valeur de A260nm = 1.Le spectre d’absorption à 260 nm d’une solution d’ADN soumise à une élévation de température progressive se présente sous forme d’une sigmoïde : c’est l…