53. Différents rôles de la cohésine

Les cohésines sont des complexes protéiques dont les sous-unités font partie de la famille de protéines SMC, protéines de maintenance structurale des chromosomes.Les extraits acellulaires d’œufs de xénope constituent un système d’étude in vitro des processus du cycle cellulaire, et en particulier de la mitose ; de tels extraits permettent la réalisation contrôlée de cycles cellulaires in vitro. Par ailleurs, on peut éliminer à l’aide d’anticorps spécifiques une protéine donnée afin d’étudier sa fonction lors de la mitose par exemple.
Des extraits acellulaires d’œufs de xénope dépourvus ou non de cohésine ont été préparés. Des noyaux de spermatozoïdes sont ajoutés à ces extraits et on déclenche la reprise du cycle cellulaire : interphase complète et début de mitose. Les chromosomes métaphasiques isolés du fuseau de division ont pu être marqués par immunofluorescence réalisée avec un anticorps anti-condensine et un anticorps anti-BuBR1. La condensine est une protéine impliquée dans la condensation des chromosomes en début de mitose. BuBR1 est une protéine des kinétochores.
Même si aucune quantification précise n’a pu être établie, les images ci-dessous sont représentatives de l’état des chromosomes fréquemment observé dans chaque condition.
Afin de tester l’éventuelle implication de la cohésine au cours de la mitose, des noyaux de spermatozoïde ont été incubés avec les mêmes types d’extraits acellulaires d’œufs de xénope (extraits T et extraits Δ cohésine). On déclenche la reprise du cycle cellulaire…